Sci Rep：新方法可监控CAR T细胞

2019年2月20日消息，—嵌合抗原受体-T（Chimeric Antigen Receptor-T，CAR-T）细胞疗法已经在血液瘤病人身上产生了显著的疗效。但是这个领域存在的挑战之一就是缺乏检测免疫效应细胞表面CARs的简单有效方法。

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为此，近日来自南加州大学Keck医学院的研究人员开发了一种新的基于荧光素酶的方法（研究人员称之为Topanga试验）去检测T细胞表面CARs的表达。这个方法利用了一种叫做Topanga试剂的重组融合蛋白，由CAR靶标的胞外结构域和海洋荧光素酶或者其衍生物组成。

这个方法涉及将表达CAR的细胞与Topanga试剂共同孵育、几次洗涤以及荧光检测。这个方法可以检测基于免疫球蛋白或者非免疫球蛋白抗原结合结构域的CARs。

研究人员还发现在Topanga试剂上加上一个表位标签不仅可以实现一步纯化过程，还使得这个试剂可以通过流式细胞术来检测CARs细胞。同时，包含分泌的Topanga试剂的上清液可以不经任何蛋白纯化直接用于生物发光检测或者是流式细胞术检测。

基于此，研究人员认为Topanga试验是一种高度敏感、高度特异性、方便、实惠而功能齐全的检测CARs的新方法。

研究人员接下来计划研究Topanga试验是否可以用于监控CAR T细胞注射到病人体内后的扩增和维持。如果可以实现，这不仅可以帮助医生找出由于细胞扩增太快可能出现中毒反应的病人，还可以帮助病人找出由于CAR-T细胞存在时间太短导致可能癌症复发的病人。

参考资料：

Preet M. Chaudhary et al. A novel luciferase-based assay for the detection of Chimeric Antigen Receptors。Scientific Reports (2019). DOI: 10.1038/s41598-018-38258-z