抗CD20单克隆抗体药物的研发概况

文丨沙罗

CD20是人类B淋巴细胞表面特有的标识，由297个氨基酸残基组成，相对分子质量（Mr）约为33×103，属于非糖基化磷蛋白，对B淋巴细胞的增殖和分化具有调节作用。它表达于90%以上的B淋巴瘤细胞和正常B淋巴细胞，而在造血干细胞、原始B淋巴细胞、正常血细胞以及其他组织上不表达。超过95%的B淋巴细胞瘤都有CD20的表达，而且其容易与抗体结合，结合后不易脱落，因此作为治疗B细胞淋巴瘤的理想作用靶点受到了人们的关注。抗CD20单抗能通过补体依赖细胞毒作用（CDC）和抗体依赖细胞介导的细胞毒作用（ADCC）对B细胞来源的肿瘤进行杀伤。

CD20单抗药物的发展进程

自1997年第一个抗CD20单克隆抗体利妥昔单抗（商品名美罗华）批准上市至今，该类药物发展迅速。根据其不同的结构、人源化程度以及Fc段修饰等大致经历了3代研发，在此过程中，该类抗体结构不断改进，药物活性和免疫原性都有了很大改善。对于已成熟上市且应用于临床的经典药物，其新的适应症不断被拓展；同时，具有极大潜力的新型药物不断涌现，大部分进入临床和临床前研究，具有免疫原性更小、药物活性更高的趋势。

以利妥昔单抗为代表的第一代抗CD20单抗药物

第一代抗CD20单抗药物以利妥昔单抗为代表，由日本IDEC公司研发，是首个获批用于临床治疗非霍奇金淋巴瘤（NHL）的人鼠嵌合抗体，于1997年美国FDA批准上市。利妥昔单抗可诱导CDC和ADCC，能够杀伤淋巴瘤细胞。自上市以来，广泛应用于治疗表达CD20的恶性B细胞淋巴瘤以及慢性淋巴细胞白血病。利妥昔单抗和化疗药物的联合使用已成为治疗某些特定类型NHL的标准方案，随后又被批准用于治疗中至重度活动性风湿性关节炎、CD20阳性的慢性淋巴细胞白血病和韦格纳肉芽肿等疾病。由上海复宏汉霖生物制药有限公司研发的生物类似药--汉利康，是我国首个利妥昔单抗注射液生物类似药，于2019年2月获批上市。

第一代抗CD20单抗药物，除了重磅产品利妥昔单抗，还包括日本IDEC公司研发的Ibritumomab tiuxetan（商品名Zevalin、泽娃灵）和英国GSK公司研发的tositumomab（商品名Bexxar、百克沙）。泽娃灵是全球首个放射性核素铟111或钇90标记的抗CD20单抗，2002年2月被批准用于治疗难治性复发性B细胞NHL。携带放射性核素的抗CD20单抗注入患者体内后，会与表达CD20的成熟B细胞和B细胞肿瘤细胞结合，通过所携带的放射性核素释放的放射线来杀死这些细胞。百克沙和泽娃灵类似，利用单抗和放射性分子碘131相连，用于治疗复发性难治性滤泡或变形的NHL。泽娃灵和百克沙均需要在专门的核医学部门进行治疗，所以在临床推广上存在较多困难。

虽然利妥昔单抗在肿瘤治疗及相关研究中发挥巨大作用，但由于其为嵌合抗体，人源化程度为67%～70%，部分患者会对其治疗无效、耐药或产生不良反应。并且由于低水平的补体活性或激活补体的细胞毒性降低，一些淋巴细胞对CDC具有抵抗作用。此外，利妥昔单抗可导致表达CD20的B细胞凋亡而直接抑制B细胞生长。因此，随着抗体人源化技术的发展，人源化程度更高、不良反应更小的第二代单抗应运而生。

以奥法木单抗为代表的第二代抗CD20单抗药物

奥法木单抗由Genmab制药公司与葛兰素史克公司联合开发，是首个全人源抗CD20单抗。相比利妥昔单抗，奥法木单抗在细胞膜表面更易结合CD20抗原，并有较慢的脱离速率和更高的补体活性。于2009年获得美国FDA批准用于治疗对氟达拉滨和利妥昔单抗耐药的慢性淋巴细胞白血病；欧洲药品管理局于2010年也批准了奥法木单抗在欧盟国家的销售和使用。此外，第二代抗CD20单抗还有维得利珠单抗和奥瑞珠单抗，二者的体外作用机制相似。维得利珠单抗是高度人源化的Ⅰ型IgG1抗CD20单抗，具有90％～95％的人抗体序列，主要针对利妥昔单抗治疗无效的NHL。奥瑞珠单抗是于2017年批准上市的全人源抗CD20单抗，用于治疗T细胞介导的多发性硬化。

第二代抗CD20单克隆抗体通过人源化或全人源改造后，极大地降低了在人体内的免疫原性，对正常组织的不良影响及产生的不良反应大幅度减少。但是随着人源化程度的提高，抗体的特异性及与抗原结合的亲和力也出现一定程度的降低。为了保证药物的疗效，人们尝试着对抗体的Fc段进行改造，从而产生了第三代抗CD20单克隆抗体。

以奥比妥珠单抗为代表的第三代抗CD20单抗药物

2013年，来自美国罗氏制药公司的人源羰基化Ⅱ型单抗--奥比妥珠单抗获得美国FDA批准上市，主要适用于未经治疗的慢性淋巴细胞白血病患者以及联合苯达莫司汀二线治疗复发性滤泡性淋巴瘤。美国罗氏制药公司公布了奥比妥珠单抗和利妥昔单抗在治疗滤泡性淋巴瘤的Ⅲ期临床试验结果，该研究表明对于之前未接受治疗的滤泡性淋巴瘤患者，奥比妥珠单抗能够显著提高患者的无进展生存期。

目前，抗CD20单抗已经发展到第三代，每一代抗体药物均有各自特有的临床应用价值。其适应证不尽相同，各有优缺点。

自利妥昔单抗批准上市，抗CD20单克隆抗体已成为许多B细胞相关疾病的主要治疗手段，其作用机制已较为明晰。在此基础上，许多新的抗CD20治疗性单克隆抗体也不断应运而生。随着三代抗体的发展，抗CD20治疗性单克隆抗体已经从嵌合抗体发展到人源化和全人源抗体，并扩展到Fc段修饰抗体，显示出越来越高的活性和越来越低的耐药性及副作用；同时，新的适应症也不断被发掘，显示出广阔的应用前景。同时基于2个或多个已知靶标的联合靶向治疗方法已被越来越多地应用于临床试验和研究中，多种与CD20靶点结合的双特异性抗体药物以及CAR-T治疗已显示了初步的成果，有望为更多的双特异性抗体药物的发展开辟一条新的道路。