迄今为止，美国FDA已经批准了6款CAR-T疗法上市，CAR-T疗法在治疗血液癌症方面也显示出了优异而持久的疗效，甚至让部分患者看到了治愈的希望。不过，CAR-T疗法以及其它细胞疗法的广泛使用仍然面对着疗效持久性、安全性、制造流程方面的多重瓶颈。在今年的美国血液学会（ASH）年会上，多家公司报告了克服这些瓶颈的创新技术进展。

利用健康供体提供的T细胞制造同种异体CAR-T细胞疗法是提高CAR-T疗法产量，加快患者接受治疗速度的策略之一。不过同种异体CAR-T细胞会被患者的免疫系统识别为外来物，最终被清除出患者体内，导致疗效的持久性下降。Sana Biotechnology公司正在开发的低免疫同种异体CAR-T细胞旨在通过对从健康供体中获得的T细胞进行改造，增强其免疫逃逸特性，并且降低移植物抗宿主病发生的可能。

在ASH年会上，该公司汇报的临床前数据显示，使用Cas12b可以对同种异体CAR-T细胞进行多重基因编辑改造，有效扰乱B2M、CIITA和TRAC的表达，避免CAR-T细胞被免疫系统识别并减少移植物抗宿主病的产生。同时在这些细胞上过表达CD47可以避免CAR-T细胞被先天免疫系统识别。在动物模型中，经过改造的BCMA靶向CAR-T细胞能够避免先天和适应性免疫系统的识别，并且表现出强力抗癌活性。

在ASH年会上发布的最新临床试验结果显示，利用这一平台制造的在研疗法rapcabtagene autoleucel在治疗复发/难治性弥漫性大B细胞淋巴瘤患者时，接受剂量为12.5X10^6个CAR-T细胞治疗的患者中，完全缓解率在3个月时为63%，在6个月时为69%。中位缓解持续时间尚未达到。不过汇报结果的研究人员同时指出，虽然T-Charge技术可以加快CAR-T细胞的生产步骤，但是对CAR-T细胞的质量检测，清除患者体内的淋巴细胞等步骤仍然需要花费时间。因此，目前T-Charge技术没有显著减少从患者体内获取T细胞到将CAR-T细胞输注回患者体内之间的时间（vein-to-vein time）。

▲Rapcabtagene autoleucel的临床试验数据（图片来源：参考资料[5]）

增强抗癌效果同时避免伤及健康细胞，“智能”CAR-NK疗法即将进入临床

表达嵌合抗原受体（CAR）的细胞目前靶点有限，原因之一是很多在癌细胞表面表达的蛋白在健康细胞中也表达，导致靶向这些抗原的CAR同时会伤及健康细胞。而且癌细胞有时候会通过丢失表面的抗原表达，逃避CAR的识别。

Senti Bio公司开发的细胞疗法通过给细胞加上逻辑回路，让细胞更为“智能”地区分癌细胞和健康细胞。该公司开发的SENTI-202是一款新一代CAR-NK细胞疗法。它携带了两种不同的逻辑回路，“OR”回路让它能够识别癌细胞表面表达的CD33或FLT3抗原，从而具有更高的抗癌潜力。而“NOT”回路在识别造血干细胞表面表达的EMCN抗原时会抑制疗法的活性，从而避免SENTI-202杀伤健康造血干细胞。这款CAR-NK疗法还表达可控释放的IL-15蛋白，进一步增强NK细胞的活性。在临床前研究中，它已经表现出良好的抗癌活性和显著降低的肿瘤外毒性。这款在研疗法预计在2023年下半年递交IND申请。

▲SENTI-202逻辑回路的作用机制（图片来源：Senti Bio公司官网）

利用iPSC生产细胞疗法，Fate Therapeutics公司公布最新试验结果

Fate Therapeutics公司在ASH年会上公布了其基于诱导多能干细胞（iPSC）平台生产的CAR-NK细胞FT576的最新临床试验结果。该公司基于iPSC的生产平台可以将经过基因工程改造的iPSC储存起来，在需要的时候扩增分化成为T细胞或者NK细胞，为生产“现货型”细胞疗法提供几乎无限的细胞来源。

▲Fate公司的基于iPSC的细胞生产平台（图片来源：Fate公司官网）

该公司开发的FT576是一款表达靶向BCMA的CAR的NK细胞。它同时表达具有高亲和力的不可切割CD16 Fc受体，最大化抗体依赖性细胞介导的细胞毒性（ADCC），同时允许NK细胞与单克隆抗体疗法联用靶向不同抗原。1期临床试验结果显示，接受单剂FT576治疗（剂量为3亿个细胞）的3名复发/难治性多发性骨髓瘤患者中，一名患者获得非常好的部分缓解，两名患者疾病稳定。在接受单剂FT576（剂量为1亿个细胞）和抗体疗法daratumumab联合治疗的3名患者中，一名患者获得部分缓解，一名患者获得轻微缓解（minor response）。

期待这些新技术不断进步，扩展CAR-T细胞和其它基因工程改造的细胞疗法的疗效、安全性，和应用范围。