我先用BanMⅠ酶切过夜,然后纯化回收,加入TE,在TE缓冲液中加入酶HpaⅠ以及其缓冲液,然后直接酶切3小时,跑电泳能看见两条亮带,质粒大小10k,切下来的是700bp,双酶切看不到700bp条带,回收。回收后跑电泳的条带如图一和图二,图一是回收完当晚就开始跑电泳,右边泳道为marker,中间是双酶切泳道,左边是单酶切。图二右边是marker,中间是单酶切,最左边的是双酶切,出现这情况是怎么回事呢?
有没有marker,如果marker也弥散,很可能是胶的问题,如果marker不弥散那就是样品的问题了
我觉得把TE换成超纯水比较好,还有电泳一定要加marker,这样比较容易发现问题