我最近打算免疫老鼠,开始用注射器推的方法乳化抗原,中间崩了好几次,抗原都损失完了,而且很费劲,就想到用超声方法乳化,破4秒停8秒,AMPL20%。昨天用自来水试发现可以很好的乳化,但是今天乳化抗原的时候就有很明显的分层现象,下层像是清亮液体,上层是乳白色的乳状剂,于是下午又用自来水和纯净水加完全佐剂乳化,发现都有分层,但是昨天确实没看到这种现象,这让我很苦恼。所以,我想咨询一下,战友们用超声破碎乳化的时候有没有遇到这种情况,可能是什么原因,还有超声破碎需要注意些什么呢?
超声乳化如果有分层现象就是弗氏佐剂和你的抗原没有完全乳化好,超声时间不够或者是超声转数不够。建议你使用PBS+佐剂1:1再试一次。我经常用注射器的方法,效果非常好。建议你买一个连接两个注射器之间的一个接头,带有螺口,不会出现崩的现象,这是专门做乳化使用的。