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2024-09-05 20:12:48
用6-OHDA多巴胺做过帕金森大鼠模型的问题怎么解决？做了很久的动物造模，成功率很低（5只老鼠只有1只会旋转），实验做不出来生活过的也很不如意，急需要各位的帮助。我从配药和坐标点两大点讲述下我的步骤，请各位帮忙指点指点。 ①6-OHDA溶液的配制：买的100mg粉末状，存放于-20度冰箱内。溶液用含0.2%维c的生理盐水配制（所用的是维C注射液），配制的浓度是3ug/ul,每只老鼠用量15ug，即5ul。每次溶液现配现用，即每天做几只老鼠，就取多少量的6-ohda配成溶液。溶液最初无色，过会就变成浅粉红色。 看了关于6-OHDA分装配制的文章，我发现有几点不一样，不知道会不会有所影响，请各位指点。 a.维c用的是粉末而不是液体形式 b.6-ohda配制成溶液再分装，而不是每次现取现配 c.配制好的溶液最初无色然后变成淡黄色，而不是浅粉红色 ②注射位点的选择：选用的图谱是英文第5版，注射部位是黑质，选择的坐标是前囟后5.04，中线左旁开1.8，硬膜下8.2 以前囟为原点，前囟和后囟的高度一致就表明固定好了。 实验步骤：切开头皮--以前囟为原点--根据坐标钻孔--微量注射器取药物（停留10min）--缝合 求各位大神指点一二，做不出实验又又找不到原因真的好着急！ |
2个回答
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6-OHDA造模很简单，造过很多，我造的是SD大鼠，小鼠也能，没怎么做，6-OHDA一般现配，现配好再分装冻存。我没试过，也不知可不可以。 1，买的6-OHDA100MG粉剂一般存放4°冰箱，用的时候配， ,2，取3mg容与1ml生理盐水中（EP管），用临床用的维C注射剂（小玻璃瓶那种），取一滴滴入。维C开瓶取一点配完药就不用了，会氧化，便宜无所谓。 3，配好的6-OHDA暂时存放4°，EP管一定要包锡纸避光（切记）。 4，配好的6-OHDA时效一般6小时，过时再配！隔夜可能会变颜色，主要是维C氧化的原因。我觉得没必要分装存起来，虽然每只SD大鼠用的4ul，剩下的很多有点浪费，不过这药不贵，做实验不缺这点钱。 5，定位注射要准，这不难，大鼠体重要注意（我们一般300克的），我不记得具体坐标了，毁损MFB，用大鼠脑图谱，找到MFB，就知道坐标了（推荐这个方法），或者查文献找坐标。 6，一般做得快的话30MIN一只老鼠没问题，配一次药可以做8-10只没问题。 7，成功率高，排除手术死亡（一般少，90%存活，死亡一般麻醉问题，PD造模不会怎么出血，老鼠一般也不会感染），术后的老鼠几乎100%造模成功。 8，简单验证效果的方法是前肢不对称试验，你也可以做旋转（术后3周造模成功）。
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