天根质粒小提试剂盒质粒浓度低的原因是什么？

最近在做载体构建，好不容易检测到了阳性克隆，准备摇菌提质粒进行酶切鉴定，进而测序。
摇菌12-16小时后用天根小提质粒试剂盒提取质粒，加入P2后溶液没有变澄清，加P3后没有出现很大的絮状沉淀。最终测浓度只有15ng/ul左右.
跪求各位指导，不胜感激

细胞生物学遗传学

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1. 有可能你的那个阳性克隆是假的，这个可能性最大
2. 你的质粒是低拷贝的？
3. washing buffer没有加酒精？

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2024-11-24 17:56:56

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1.摇菌的时候菌液的浓度怎么样？
2.换个别人的试剂盒试一下~
3.P2的澄清也不是很澄清，只不错是透明而已吧~~肯定不会和水一样~

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2024-11-24 17:58:15

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你重新提一遍再确定是不是有问题，对于阳性克隆，最好先测序，再进行酶切鉴定，测序是最好的鉴定方法

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2024-11-24 17:59:49

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好不容易检测出阳性克隆，一般来说是哪里出了问题，你所谓的阳性克隆不一定是真的阳性克隆，可能存在假阳性

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2024-12-02 17:46:34

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