GST 蛋白纯化实验，包涵体蛋白如何变性？变性后能否变性液直接过柱？

包涵体蛋白如何变性？用啥溶液？变性后能否变性液直接过柱？我用的是GST 纯化预装柱PAG001-005C ，protocol没有相关描述。。。

细胞生物学分子生物学生物力学

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我上个月刚做过这个，建议用8M尿素或者6M盐酸胍变性。先复性再纯化,选择PBS还是TBS作为基础复性buffer，同时可以加入：还原/氧化型谷胱甘肽，L-Arg,甘油等帮助蛋白复性。

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2024-11-21 23:38:57

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你的意思估计是复性后蛋白有沉淀，所以不好过柱、包涵体本身就是纯蛋白，不需要纯化吧！

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2024-11-21 23:42:01

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包涵体变性后需要用0.45的膜过滤，否则会堵塞柱子

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2024-11-21 23:50:22

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