构建植物表达载体上的疑惑:载体是pbi21,将用来转化拟南芥,构建的过程中,我用双酶(Xba I和SmaI)酶切,后酶连我的目的片段,直接使用的是pbi121自身携带的35s启动子,没有去掉终止密码子(TAG),后面保留有GUS。 我这样做行吗?
应该是可行的。
这样GUS染色就做不了了。最好说明你的目的是什么,便于大家帮你看可行否。
gus应该启动不了了吧?
第一,pBI121上面有35S,你是要双启动?
第二,启动子上怎么就有终止子了呢?难道是个TAG就能叫终止子?
终止子是mRNA上的概念,在CDS的上游出现一个TAG不会影响你基因的表达的!