2025-03-25 08:05:27
提取总RNA进行RT-PCR,但用试剂盒提了三次,为什么效果都一样不好?因试验需要从猪胰脏中提取总RNA进行RT-PCR,但用试剂盒提了三次,效果都一样不好。 |
我认为过程看来没有什么问题,既然是提了三次,那么会不会是试剂盒的问题呀?这是其一;第二,我认为RNA发生降解的可能性也要考虑,或者你用1.0凝胶来再跑一次电泳,不要用普通的浓度;其三,做个对照吧,在取样时候,也提一下其他的组织,这样心理有个数。哈哈,不是高手,只能说说自己的一点经验,仅供参考啊! |
取组织时,动作要快,切成尽量小一点的块,马上用RNAin处理。提取时,研磨过程中要一直保持有液氮,即低温。还有就是你跑胶的条件如何?电泳液要新的,最好有专用的电泳槽跑RNA,要是跟跑质粒的在一起就危险了。Buffer等也最好拿一管新的。 |
提RNA的时候要低温提取,用液氮和冰版,而但是组织RNA的降解不是特别的快,组织尽量弄小一点在提会好一点。 |
提问时间: | 2025-03-25 |
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