免疫荧光双标求助,绿色是胞浆着色,红色是胞膜着色。但是红色总是做不出来。有一个细胞样本已经成功,相同条件,但这个样本不知道为什么会这样,考虑过样本处理问题,重新复苏细胞,爬片,固定,固定时间也分几个,但结果还是如此。在线等。求各位大神给支招,文章就等这个图了。
实验步骤如下:
可以换PFA进行固定试试,丙酮有通透细胞作用。
做不出来的红光是什么样子?是上面那个图的样子吗?如果是上面那个图的话,建议曝光时间调低,应能能够达到你想要的膜表达,只是会非常弱,可以考虑是弱表达