2025-01-12 12:04:40

Aβ25-35 处理PC12细胞异常的原因?

我用Aβ25-35 处理PC12细胞,应用96孔板,种板10000/孔。应用5、10、20、40、60微摩尔的Aβ25-35处理细胞24小时后进行观察,各损伤组细胞形态较对照组均有明显损伤表现,而且各浓度组中高浓度损伤程度会大于低浓度。

接下来我应用CCK-8(Dojindo Lab)测定细胞活力,结果很郁闷:损伤组的OD值不但没有下降反而有所上升。而且高浓度组大于低浓度。
后来我们该用MTT(sigma)测定细胞活力,测得5微摩尔浓度浓度的细胞活力下降为60%,但是其他浓度组的细胞活力基本也是60%左右。
现在这个问题不知道要怎么解决   

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3个回答

细胞形态改变不一定意味着细胞死亡,而MTT或CCK-8检测的是活细胞,所以肉眼观察的结果与试剂检测的结果不相符是可以理解的。另外CCK-8检测条件较多,不一定符合本实验的要求。如果MTT检测的结果是各浓度损伤程度相似,建议你将Aβ25-35 的稀释浓度加大。    

2025-01-12 12:57:52

个人感觉细胞形态跟细胞活力是相关的,如果cck8做不出结果可考虑做一下MTT。不过要多重复几次结果才比较可信。建议做一个超大浓度组,看一下细胞活力是否有统计学性差异    

2025-01-12 13:18:26

做Aβ的都深有同感啊,文献中不管是中文还是英文,明明就是能有毒性,却怎么做都做不出来。

建议检测一下细胞凋亡情况,这种情我们实验室有人利用Abeta25-35诱导SH-SY5Y是遇到类似情况的。

   


2025-01-12 15:08:11

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