点晶体时蛋白质沉淀的原因？

最近做一个30K左右的蛋白，纯化过程还比较好，可是一点晶体全沉淀了，各位有没有遇到过，怎么处理的？

生物力学生物物理学

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我们实验室也碰到这样的类似蛋白，浓度即使是1mg/ml时也会沉淀了。我们做了DLS，DLS表明其再浓度为0.5mg/ml时候都为20聚体，我们目前正在改善Buffer条件，希望进一步优化。我觉得你这个蛋白不妨先做一下DLS，看一下聚合状态，然后结合一下DLS优化一下Buffer条件就能解决。

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2024-12-07 23:06:23

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是在和池液混合后马上沉淀的么，还是在放置一段时间以后出现沉淀？

如果是前者，是否纯化后放置的时间太长；如果是后者，这是结晶的正常现象

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2024-12-07 23:14:33

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先试试降低蛋白concertration ,每次降低一半，直到有三分之一或者一半以上没有沉淀为止

提高NaCl浓度：500mM、1M 都试试

还不行就重新截取片段

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2024-12-07 23:21:07

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很正常啊，我们实验室有的优化的一个条件就是一点上样立即就沉淀，可是第二天就从沉淀中看见了晶体，有些晶体是从沉淀里长出来的

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2024-12-07 23:26:30

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