本人最近在用胰蛋白酶对组蛋白进行水解,水解后的多肽溶液当时放置在4℃冰箱中一段时间,后来经过脱盐处理,进行液相色谱-质谱分析。想请问,水解后的多肽溶液放置在4℃环境中,对多肽本身会产生什么样的影响,对后续的液相色谱-质谱鉴定会有影响吗?
放4度之前有否进行酶的灭活处理呢?如果处理了问题不大
不知道三氟乙酸这个浓度足够终止酶活性没。能直接90℃煮个5分钟,或者用变性剂之类的。另外是否无菌或者加了抑菌剂?这也可能影响结果,我纯蛋白有一次就意外的染菌经历。
你这种操作方法,会导致多肽本身降解非常快 ,保存的话 ,还是需要放在-20度 干粉保存