各位,我要检测的蛋白在细胞核与细胞质均有表达,之前用免疫荧光法检测过了,但我导师说还要定量检测才行,所以我现在想用Westren Blot检测它在细胞核与整个细胞的表达情况。请问有人做过类似的实验吗,如何用Westren Blot专门检测核内的蛋白,内参选b-actin可以吗?
当然可以的啊
你导师不是要你定量检测蛋白吗?用western不好定量吧…用ELISA比较好吧如果一定要WB的话,只能用标准品蛋白设置个梯度,最后只能杂出个大体浓度范围。
这样的话是不是分别提取核 和胞质,再从核和胞质中分离蛋白,如果做细胞的话,细胞最好多一些。
有人用HISTOE H2A作内参,你可以试试
做免疫组化吧,可以很清楚的看出来