2025-04-06 22:25:12
如何做质粒转染?课题方向想做某基因对上皮间质转化的影响 |
如果确定要做质粒转染。那么首先要有质粒,然后才能转染。 |
做稳转的话慢病毒大概2周搞定。质粒顺利的话两个月。我选了后者,运气不好,做得死去活来的,过年还不能安生。当然如果顺利的话就不会跟我一样啦。首先细胞要耐得住折腾,然后瞬转的效率要越高越好(做western检测),然后这批细胞尽量两个月不要污染。。。其实我也还没做出来。做不做得出来要到两三个月后跑个western才知道。慢病毒的话,转染后就有7,80的转染率,基本上不要筛选,直接进入下一步实验。这也是价格昂贵的原因。 |
如果实验室慢病毒载体构建和慢病毒包装(这个可以找公司做,但是费用较高,顺利的话也要1万,但是省时省力),慢病毒转染(这个比较麻烦的,利用小RNA阻断基因表达),以及后续转染后阻断效果的验证技术部成熟的话,可以考虑应用药物阻断,有许多基因都是可以用药物阻断的,如果已是成熟的理论,那你就省事多了,直接进行后续实验。建议考虑。 |
提问时间: | 2025-04-06 |
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