HPLC分析中,紫外检测器是目前实验室最普及的一种检测器,但对于一些紫外吸收很弱的物质来说,就不能使用紫外检测器进行检测了。所以我们可以通过加入一些特殊的化学试剂(即衍生化试剂),在一定的条件下与待测物发生反应,检测二者结合物的紫外信号强度来达到分析测定的目的。以单糖PMP衍生化为例,单糖因其结构的原因,紫外吸收很弱,因此将单糖和PMP(1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮,即衍生化试剂)在碱性条件下反应,反应结束后1个单糖分子可与2个PMP分子形成稳定的衍生物,该衍生物在紫外区有强紫外吸收,可以被紫外检测器检测。 |
衍生化是一种利用化学变换把化合物转化成类似化学结构的物质。一般来说,一个特定功能的化合物参与衍生反应,其物理化学性质会有很大的改变,由此产生的新的化学性质可用于量化或分离。比如单糖在普通C18色谱柱上难以保留,并且紫外检测信号较低,但是经过衍生化后,可以很容易在常规C18色谱柱上实现基线分离,并且检测信号较高,重现性较好。 |
提问时间: | 2025-01-17 |
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