2024-10-31 17:12:07

小鼠的脂肪间充质干细胞污染怎么搞?

养的是小鼠的脂肪间充质干细胞,最近经常出现这种状况,细胞一天不换培养液就会有点浑浊,然后慢慢贴壁不紧,在用PBS洗的时候就脱落了。求大神支招。 1.png

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细胞生物学×

10个回答

全程无菌状

2024-10-31 17:20:55

操作要无菌,请问你的培养基中加双抗了吗 

2024-10-31 17:22:38

感觉是浮在细胞表面的,脂肪间充质干贴壁一般较牢,刚出现污染时,先用PBS多冲洗几遍,冲洗一下细胞,其次如果污染严重就加一成的两性霉素试试,我们实验室之前也有过类似的情况,就用两性治好了。 

2024-10-31 17:24:23

感觉不是细胞层面 是不是调焦没对好 

2024-10-31 17:24:57

我觉得细胞状态还是挺好的,应该是你养得过于密集了,传代试一下吧。 

2024-10-31 17:26:22

双抗杀一下,不像污染 

2024-10-31 17:27:15

奥,不像污染,就是细胞有点脏。有时候血清灭活后会这样。你用PBS多漂洗几次,然后传代,低速离心,再试试。

2024-10-31 17:28:15

细胞一旦污染,通常是必须扔掉了,双抗和过滤只是无用的,无菌操作最关键,但生物安全柜和培养环境也很常会污染源的。要保证每一步都是心里明白无误,并对每一种试剂和操作作检验,并尽可能减少无效操作,减少吸管过试剂瓶口的次数。 

2024-10-31 17:29:03

传代时没消化好,有些地方没消化下来,或者吹打不够均匀有团块,细胞挤在一堆叠起来长就会这样。培养基没浑浊一般不会出现类似形状的污染。血清自带的絮状物不像图片成颗粒圆球状,是飘在培养基里面的,晃动培养瓶镜下可见明显移动。 

2024-10-31 17:29:50

看着不像污染,或者提供更大倍数图片?如果是原代刚提出来不久,有可能是残留的组织;如果是好几代了,有可能是上一代太密了导致胰酶消化时成团聚集脱落,那么这一次要提前进行传代消化,比如说70%汇合度就要消化传代了。如果是污染,那我建议还是扔掉,即时用双抗,也要花费时间、精力来处理。且不说脂肪干细胞娇贵,俗话说杀敌一万,自损八千,即使成功把污染解决了,估计那是细胞也差不多完了,比如老化、调亡等等。

2024-11-21 05:42:44

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