如果细胞消化传代后就死了，那可能是消化过度造成的，建议调整消化时间。 

应该是你细胞状态不好，建议先晒下能稳定过关的试剂，主要是血清与细胞来源（应该准备成球前，含血清时状态要很好，）统计过几个老师成干实验，总结说下，不对处大家请指出，血清不用说，应是几个最好品牌中的优者（不见得是最贵的，但肯定是最好用的，这要靠老师长时间培养经验筛出来的），无血清培养（要根据自己的细胞通过文献找到并确定方案），三次成球后，接种动物，如果那步失败，细胞状态不好。个人认为，还有就是晒出好用试剂很关键。细胞身份来源都很重要。 

消化时间并不能说明消化是否到位，每个人消化的操作会有差异，只能说从战友的描述来看消化损伤细胞的可能性较大。 

我的肿瘤干细胞用的0.05含EDTA的胰酶37度水浴消化10分钟 

消化时间、酶的浓度、作用环境的温度