可以考虑lipo转染试剂对细胞的毒性了（还有就是细胞铺板的状态了）。你看看lipo的说明书说细胞的汇合度是多少的。我记得lipo2000是要80%到90%的细胞的汇合度的。不同的转染试剂有不同的细胞汇合度的要求。可以看看说明书，按说明书操作来，转染一般没问题的。 

换个方向吸液，向上侧倾斜，从上侧吸液！对比一下再考虑考虑 

 1. 确保你细胞状态比较ok，磨刀不误砍柴功。2. 如果细胞属于贴壁不牢的那种，那就注意移液操作时枪头不要直接接触细胞，并且轻柔操作，液体剪切力也能冲走细胞。 

可以换lipo3000吧，细胞毒性相对较小。siRNA转染首先要保证细胞的活性可以，毕竟是外源导入，融合度应该和细胞脱落无关的 

我觉得是操作问题，楼主可以换个人操作下试试。以前一个师姐做了一个月转染，细胞都是有脱落，那次说让我试下，我不懂她的实验，就按我的手法帮换液，加药，当然，**作的过程，她手里是捏把汗的，因为我换液加药动作挺草，而且快，毕竟她每次都小心翼翼都大部分有脱落细胞情况，不过处理完她镜下看时，并没有出现细胞丢失的孔。感觉楼主太过小心了，可以尝试下不那么在意，正常操作。