2025-01-30 20:18:23

β-catenin的检测用免疫荧光好还是免疫组化好?

各位大侠,我要培养一群细胞,从中分选出亚群细胞,想检测一下里面β-catenin的表达和激活。请问是用免疫荧光好还是免疫组化好?另,需要购买激活的β-catenin和非激活的β-catenin抗体,但抗β-catenin的磷酸化抗体有多种,还有针对不同磷酸化位点的抗体,不知道我该购买哪种?请各位大侠指教一二,谢谢!
我主要是看β-catenin在这个亚群中是否激活,以及用一定方法处理后β-catenin的反应情况。非激活状态下的β-catenin主要是作对照。


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3个回答

如果就是看看catenin的表达情况和激活后情况,要激活catenin有很多方法,可以转染 或阻断GSK3的磷酸化等 看表达情况可以用免疫组化法 

2025-01-30 20:18:53

 最简单的 方法就是作免疫组化或免疫荧光了,激活的细胞其catenin是位于细胞核中的,而未激活着则主要位于细胞膜上,抗体应用非磷酸化的就可以了,如果你只想证实一下激活就足够了。 

2025-01-30 20:20:02

β-catenin的41,45,37,33位点则与β-catenin的磷酸化有关
而33,37位点还涉及其后的泛素化过程,发生磷酸化后的β-catenin会被Slimb /β-TrCP识别,在这两个位点触发泛素化,而导致降解
了解了这几个位点的参与作用后,就该知道怎么样选择抗体了。 

2025-01-30 20:20:58

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