western blot 很好用的 这方面的抗体也很成熟了 

买P38磷酸化抗体做Western就行了，挺好使的。 

用磷酸化的抗体和现成的试剂盒都可以，晶美的UPSTATE产品不错。 

康成生物工程有限公司：提供针对某个信号通路的ELISA试剂盒，采用双抗体夹心法，可以快速，准确，和灵敏的检测MAPK、JNK、P38MAPK、Akt、IκB-α、NF-κB p65 磷酸化及非磷酸化水平的变化。同时，检测GAPDH含量，用以修正蛋白质浓度等的影响。 

PhosphoELISA 试剂盒---------简单、有效、定量分析位点特异性磷酸化蛋白
PhosphoELISA利用ELISA原理，板孔预先包被磷酸化非依赖性抗体（pan antibody），该抗体通过类似免疫沉淀的方式捕获待测样本中总的特异性蛋白，即磷酸化和非磷酸化蛋白。随后加入位点特异性磷酸化蛋白抗体作为检测抗体，借助藕联HRP的二抗和显色系统，精确定量位点特异性磷酸化蛋白的多少。
试剂盒优点：* 灵敏度高，比普通Western Blot 敏感10倍，* 优化的实验操作步骤保证了结果的准确和可重复性，* 4小时完成全部实验操作，比其他方法明显提高工作效率，* 实现高通量检测 

如果你要测定p38的活性，你必须做激酶分析（kinase assay），你需要免疫沉淀P38，然后买底物蛋白做体外激酶分析，这样的文献很容易在google中搜到。如果p38的活性检测在你的实验中不是非常关键的一个核心数据，你可以用代表p38激活形式的特异位点磷酸化抗体做western来代替激酶分析，这样的抗体如前面帖子所言，可以在cell signal查到。用哪种策略关键还是看你的p38活性这个数据在你整个工作中是不是非常重要的一个核心结论。 

经典的还是用Western blot检测，NEB公司的抗体是可靠的，当然CST是新成立的公司。p38MAPK活性的检测方法分两种: 同位素法和非同位素法。1　同位素法
根据p38MAPK可特异地磷酸化底物蛋白活化转录因子(ATF-2) ,变性的p38MAPK 蛋白依其分子量在含有ATF-2 蛋白的聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶电泳上进行迁移,复性后的p38 蛋白激酶则可以将[γ32 p ]ATP 参入其底物中,通过检测ATF-2蛋白中32 P 的量反映p38 蛋白激酶的活性。2　非同位素法
p38MAPK可将活化转录因子(ATF-2) 第71 位氨基酸丝氨酸磷酸化,因此通过测定ATF-2 磷酸化反应程度可间接反映p38 蛋白激酶的活性。磷酸化ATF-2 与标记有辣根过氧化酶或生物素标记的特异性抗体结合,采用Western blot 技
术,利用放射自显影, 测定胶片光密度, 从而计算p38MAPK 活性 。 

 你好，我染的是HL-60细胞，也是悬浮细胞。可以给你看看我的实验方法。
吉姆萨染色步骤1、种六孔板，每个浓度两个复孔。作用24小时之后，收集细胞。2、用流式管收集细胞，5min，1200rpm。PBS洗两次。3、PBS和血清1：1混合，共400ul，重悬细胞沉淀。（注意，此时仍在流式管里）4、涂片子（泡酸）。每个片子用枪在左右各加上20ul细胞悬液，用盖玻片涂匀。5、等风干后，泡入甲醇固定。15min，风干。6、配制吉姆萨染液。PBS（PH=6.8）1:9稀释吉姆萨母液，避光。7、染液滴到片子上，完整覆盖。染色15min。8、倒掉染液。用PBS洗脱（PH=7.2）。第一次浸泡5min倒掉。之后每2min冲洗一次。直到对着光看不到片子上的颜色为止。9、观察之前，用二甲苯透明。其中，56步和89步之间可以隔一段时间，不必要连续操作。染色时间越长，洗脱时间最好也越长。观察片子之前可以先透明再观察。
吉姆萨染液配制（1）吉姆萨（Giemsa）染液：Giemsa染料 1 g，甘油66 mL，甲醇 66 mL；Giemsa染料溶于少量甘油，研钵内研磨 30 min 以上，至看不见颗粒为止，将全部剩余甘油倒入研钵，于 56℃温箱内保温 2 h，加入甲醇，搅匀后保存于棕色瓶中；临用时用 pH=6.8 的0.2 mol/LPBS 缓冲液稀释 10倍成工作液使用；
（2）PBS缓冲液： NaH2PO4· 12H2O 35.12 g溶于1 L双蒸水， 配制成0.2 mol/L溶液，调pH=6.8，过滤冷藏