不知道你是不是用的一步法，一步法虽然方便，但缺点也很明显，即反应溶液的pH值是一个均值，水溶性的碳化二胺既可以结合蛋白同时也可以将所有物质结合在一起，因此很容易使得微球发生团聚，形成的沉淀大小无法控制且分布不均。

推荐使用两步法包括在低pH条件下使微球和水溶性的碳化二胺反应，羧基形成活化中间体，然后洗涤去除未反应的碳化二胺。需要注意的是羧基活化后的中间体不稳定，容易发生水解，因此洗涤的过程必须快速以减少活化基团的水解。当加入抗体后需要调整溶液的pH值（pH＞8）使抗体的氨基基团处于游离状态。在偶联反应完成之后，通过洗涤将未结合的抗体去除干净。虽然两步法的步骤更多了，但可以更好的控制反应的每个过程从而避免微球发生凝集。

建议加入过量的抗体到已活化的微球中进行反应，这种方法只允许微球和抗体之间发生结合反应，而不允许抗体和抗体之间以及微球和微球之间发生结合反应。