如果想做，就多设计几个梯度吧。想节省就在24孔板里做。用量少。siRNA搞几个梯度。转染试剂在搞几个梯度。然后两两间组合下。看看哪个组合转染效率最高。稀释siRNA和转染试剂的无血清培养基可以采用opti-MEM培养基。对细胞有好处。 

首先转染肯定是需要好的细胞状态的。如果细胞状态不佳肯定是会影响到细胞的转染的。比如你用脂质体转染，因为脂质体转染需要无血清条件下转染，再加上脂质体转染过程中对细胞的毒性作用，如果细胞状态不佳不谈转染效率了。可能转染后细胞都要死上一部分。最后，我们使用带荧光的siRNA进行转染，是确定转染的一个条件，或者说是转染的体系。因为不同的细胞对siRNA与转染试剂的比例需求是不一样的。可能适合这个细胞的条件就不适合另一种细胞了。所以需要对siRNA与转染试剂的比例进行摸索。一般比例控制在1:2到1:8之间进行优化。找到最佳的比例。最后固定这个比值，使用这个转染体系去转染目的siRNA。最后如果刚开始做，首先确定一下自己的细胞类型。一般情况下，原代细胞较细胞系相对难转染。神经细胞也很难。一般可以考虑电转或者病毒。相对效率高。也可以去看看市面上鱼龙混杂的转染试剂。靠着火眼金睛看看选选。 

转染带荧光的siRNA。转染后6h就可以看荧光了。转染进去的细胞会发出荧光的。具体可以在荧光显微镜下看。也可以上流式检测转染效率的。如果想通过荧光显微镜观察的话，由于荧光显微镜观察荧光需要一定的量。所以siRNA不要低于20nM吧。不然荧光可能太淡了而无法观察到。下面是用荧光显微镜观察的转染效率。 

首先要关注一下转染效率是否有问题；如果确认转染效率没问题，再考虑是不是选择siRNA的问题。