自己做过一些皂甙的分离,也和周围的人交流过，觉得不是那么容易.一般硅胶柱用氯仿-甲醇-水或乙酸乙酯-乙醇-水洗脱，比例一般是6-4-1;7-3-0.5;8-2-0.125等。但好象很难一个接一个出来，一般还是要通过ODS进一步纯化，有的还要上液相，或者这几个方法交替进行，有时液相上一个峰接下来点板发现是两个点，还要进一步刮板。所以根据不同的情况,需要，分离难度也是不同的。

其实皂苷是最容易分离纯化的,一般一个植物拿来,包括提取,分离,大概1个半月就能全部搞定的.因为含大量皂苷的植物,正丁醇提取出来的东西除了皂苷外很少有别的物质干扰的.样品怎么会粘呢,溶解后吸附在硅胶上,再哄干,根本不会粘的啊,也不需要什么加压的啊.一般就用甲醇-氯仿-水进行剃度洗脱就OK了,比例控制的好话,是一个一个化合物出来啊,即使不纯也只需要稍微醇化就OK了。

一般来说，在反相层析材料如Rp－18等出现之前，皂甙的分离纯化是天然产物化学的一大难题。同时，在1D,2D NMR普遍应用以前，皂甙的结构鉴定更加困难。一个皂甙类化合物，即使只连接有4个糖，水解定糖的种类及连接位置就颇费时日。当然，目前的条件，这些不再是难题。皂甙类化合物分离的难点在于，同一种植物种含有的皂甙类化合物往往是甙元相同或相近，糖链不同；或者糖的个数相同，而连接顺序不同。这样的情况下，传统的硅胶柱层析是无能为力的。比如，甙元相同，糖链的糖基个数也相同，只是糖的连接顺序不同的化合物往往在硅胶的TLC上显示一个斑点或Rf值极其接近的斑点，这时无论用柱层析还是P-TLC都是相当困难的；而有的化合物是糖链完全相同，而甙元的差别仅仅是一个羟基或是一个甲基，此时在正相TLC上就完全是一个斑点，无法分离。此时需要借助反相材料如Rp－18。一般来说，正相材料可以把糖链的糖基个数不同的化合物分开，而反相材料适于分离糖链相同或相近而甙元稍有差别的化合物。我的经验是，硅胶主要体现糖链大小的差别（如糖越多，Rf值越小），Rp－18主要反映甙元的差别（如一个四糖苷和一个甙元比较，如果那个甙元上有比四糖苷的甙元更多的羟基的话，往往是四糖苷的Rf值更小，当然这与皂甙的类型有关）。当然，常规反相柱层析对于糖链有7，8个糖而差别仅仅是糖上的某个取代基（如Ac－，肉桂酰基等）的位置或构型不同的化合物是无能为力的，此时只能借助于HPLC。对于一些溶解度较好的化合物，P-HPLC还是较快的；而皂甙类化合物往往在甲醇或乙腈种溶解度较小，在制备时扎一针得到的东西很少，这就耗时间了，而皂甙类往往分子量较大，做谱的时候需要量也较大，有的化合物扎几天才得到足够做NMR的量。此外，在含皂甙的植物样品提取后，如果还含有大量的黄酮类化合物，最好用聚酰胺或sephadex LH－20将黄酮和皂甙分开，否则黄酮类化合物影响皂甙的TLC检识。