经BSA封闭的偶联有IgG抗体的微球,在保存一段时间后失活,该怎么解决呢?
在偶联时使用更高浓度的IgG抗体会提高其偶联效率,使BSA不容易与微球发生反应。
随着保存时间的推移,溶液中的蛋白会变的更容易吸附到微球的表面,这种抗体活性的丧失可能就是这个原因引起的;因为随着更多蛋白被吸附,分子间变的更加的紧密,导致抗体的构象发生改变从而失活;如果确实是这样的话,那么在偶联时应该提高IgG抗体的浓度,使抗体可以偶联到更密集和垂直的微球表面。
保存缓冲液中BSA的浓度很重要,当BSA的浓度过高时会与IgG抗体发生竞争现象。