我的条带不齐，背景还很脏，我BCA蛋白测定算的浓度，封闭1.5h，一抗1:1000,4度过夜，二抗1:2000,1.5h,我也不知道问题出在哪儿了，都做一个月了，快郁闷死了，希望大家帮帮忙（我做的是组织）
组织定量本来靠测浓度就不准，建议：先测浓度，按浓度跑内参，然后按内参灰度调整上样量。ps：你的抗体很不好 内参跑成俩带 不好扫灰度
一抗浓度太高，建议1：10000，二抗1：5000，这样背景就没有了。内参不齐和你上样量有关，根据灰度来调整上样量即可。
