在用硅胶柱梯度洗脱之后,大家都是怎样合并流分的?有什么样的经验可以交流一下吗?文献报道说有的比较粗,就按每个梯度合并,再细分;有的比较细,以TLC的结果跟踪,最后按照TLC的结果合并流分再细分。按道理说,这两者是殊途同归的,大家一般比较倾向于哪种方式呢?
你说的比较粗具体什么意思。都以TLC分的吧,也有按色带分的,但比较不准。
一个梯度会洗好的成分下来,这样子做后面再分还有很多要分的。
“按每个梯度合并,再细分”, 这种方式我们是很少采用的,除非你是很粗的粗分,但既然你是上过一遍硅胶的流份,不管怎样,样品还是有一定的分离度,所以还是TLC点板跟踪的好, 怎么合并主要取决于你的目标点,尽量做到目标点不分散,这样损失才小,还有取决于你目标点的纯度问题,在分离的过程中会发现有的流份含有的目标点的纯度不一样,就是有的含有杂质多,有的杂质少,这时你就要看纯度高的样品量有多少,量少的话就要和不纯的一起合并或者把不纯的样品纯度再提高一点和较纯的一起合并。