2024-11-17 16:34:12
关于过氧化氢的浓度及其诱导细胞凋亡 ,如何计算过氧化氢浓度?我的实验是用过氧化氢诱导晶状体上皮细胞凋亡。购买的是30%H2O2,产品说明相对分子量34.01,密度1.11g/cm3(立方厘米)。我用的过氧化氢终浓度是250uM/L,文献报道该浓度可诱导90%的细胞凋亡,而我实验却一个凋亡细胞都没有(用TUNEL染色)。回头去找原因,我想是不是我的浓度弄错了,我是这样计算的:摩尔浓度=(1000×30%×1.11)/34.01 然后再稀释成我想要的浓度,有文献是这样写的:30ml的培养液中加入30%过氧化氢8ul,使培养液中的过氧化氢浓度为300uM/L,另一文献是这样的:5ml的培养液中加入3%过氧化氢51ul,使其终浓度为0.9mM/L,不知道这2篇文献是怎么算出他们的浓度的,我觉得我的算法应该是对的,请各位站友帮忙看看。不胜感激! |
国内的H2O2的质量和国外的有很大的差别的,反正我看到的国外的文章报道的诱导凋亡的浓度是纳mol级的,国内的试剂如果是真的做出来的该是豪mol级的,我师兄做的是用H2O2诱导的心肌细胞的凋亡使用的浓度是豪mol级的.我可以肯定他是这样做出来的,但是中间经常要换新的过氧化氢来做,因为不是很稳定.不要期待使用国内的试剂可以用豪mol级的过氧化氢就可以做出来,如果是有文章这样写,我觉得一定是不真实的,如果不信你可以试试 |
30%过氧化氢约8.82mM,然后根据加入浓度算出是多少倍的,也就是我们常说的几X,再用总体积来出这个稀释倍数就是你要加入的量呀,比如我的终浓度是100μM,那30%的H2O2就是8.82/0.1=88.2X,也就是说使用时要稀释88.2倍,如果我是用六孔板养的细胞需要处理,那么加入的30%的H2O2的量就是2/88.2=0.0227ml=22.7μl。 |
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