做WB，用碧云天的SDS－PAGE制胶试剂盒配的10%分离胶，4%堆积胶，电泳：100V恒压跑完，约2h，跑完marker条带清晰，转膜350mA恒流1h，冰上，转完marker就下半部分不见了或者糊了，飞起来了，已经出现好几次了。
应该跟marker有关系，转膜可能也有点过了，部分小蛋白转过膜了。
电泳槽里还是很不错的，那就是转膜出现问题，你的滤纸海绵什么的 浸泡完全吗？气泡一点要赶完，PVDF膜完全浸泡了吗？
pvdf膜用甲醇10s激活，过水5min，转膜液中平衡5min。
会不会胶制得不好。我有时候胶制得不好MARKER跑出来就不是特别好。
