请问大家蛋白酶抑制剂pmsf的具体配方,一般都用多少浓度的。以前用师姐的,每次用时稀释1000倍,不清楚是多大浓度的,现在要重新配置。还有对异丙醇有什么要求么?配置后的pmsf需要高压么?-20保存么?
PMSF一般配置成100mM的储存液,配制方法:溶解174mg的PMSF(苯甲基磺酰氟)于足量的异丙醇中,定容到10ml;一般使用浓度为1mM,它的有效浓度为:0.1mM-1mM;它对异丙醇没有特殊要求,分析纯即可,它也可以用DMSO进行配置,储存浓度同样为100mM,配置完后不需高压,直接放-20度保存即可。注意PMSF对呼吸道粘膜、眼睛和皮肤有很强的危害性,吸入、误服或通过皮肤吸收可致命,操作应在化学通风处中进行,并戴手套和防护镜。
PMSF(100mM)在-20度中不会变性,可以放心使用,但是我建议你配的时候分装到ep管里,这是因为,在低温时,虽然不会结冰,但是PMSF会析出(晶体状,溶解度降低的原因),所以使用的时候如果不注意的话直接取用,其实浓度非常的不准了.而让他重新完全溶解,需要好多时间,而且是剧毒,操作不方便。如果分装了小管,每次只取一小管(如50ul)用枪头(微量加样器)反复吸取打出就容易完全溶解了。