我用酶消化法养牙周膜成纤维细胞,用的是II型胶原酶(5mg/ml)和Dispase酶(2.5mg/ml)混合,37℃消化30min,消化完用含血清的培养基洗两遍,重悬后在显微镜下可以看到大量圆形悬浮细胞,但就是不贴壁啊!!!培养24小时后都看不到贴壁细胞,不知道是怎么回事?是我消化过了吗?求大神指教,谢谢!
应该是消化过头了
过夜消化的必须放到4度冰箱中进行,酶的活力与温度有关。