根据朗伯比尔定律:A=K*B*C,其中K是摩尔吸收系数,B是光程长,C为样品浓度,前两者两者都是常数,所以吸光度A跟浓度C成正比,但当样品浓度变大时,吸收质点间隔变小,质点间相互作用,对特定辐射的吸收能力发生变化(K 变化),所以会产生误差。对于一般的紫外仪器,当吸光度超过1ABS时,易出现测定误差。如果浓度再高则需要稀释或使用短光程池使吸收值降低后再测定,也可以使用杂散光更低的仪器进行测量。 |
比尔定律在有化学因素影响时不成立。解离、缔合、生成络合物或溶剂化等会对比尔定律产生偏离。离解是偏离朗伯-比尔定律的主要化学因素。溶液浓度的改变,离解程度也会发生变化,吸光度与浓度的比例关系便发生变化,导致偏离朗伯-比尔定律。 |
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