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2024-09-01 22:35:24

PVDF膜为什么要在甲醇里泡？

做WB的时候，PVDF膜为什么要在甲醇里泡呢？

药理学药物化学

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PVDF膜一定要在纯甲醇里浸润的！不然蛋白结合不上去。在100%甲醇里短暂浸润（不超过15s），去离子水浸润5min，再用转移缓冲液平衡10min。其目的是为了活化PVDF膜上面的正电基团，使它更容易跟带负电的蛋白质结合。如果是小分子的蛋白转移时，还要多加甲醇也是这个目的。如果膜不幸干了，也是要按同样程序处理。

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2024-09-01 22:36:51

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甲醇浸泡几分钟以后往甲醇里面缓缓加入转移缓冲液，然后再更换到转移缓冲液中，这样效果会更好。没必要中间再泡去离子水，这样反而不好。

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2024-09-01 22:37:52

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补充一点，只要看到膜浸透了，就可以捞出来了，多浸泡一会而也没有关系，然后丢到转膜缓冲液里15min以上即可，转膜液里也有甲醇，洗不洗都行。

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2024-09-01 22:39:14

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提问时间：	2024-09-01
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