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2025-04-02 03:17:28
杂质和主成分的分离度时好时坏，为什么呢？先说一下色谱条件，流动相：磷酸盐缓冲液：乙腈混合，色谱柱：氨基柱，检测波长210nm，流速1.0，柱温：35。稀释剂使用50%乙腈水溶液。我们之前有个片剂，除了流动相比例不同以外，其他条件都相同，主成分保留时间在18-19min，和前面的杂质都可以良好的分离。现在同一个主成分只是剂型变了，所以辅料就不同了，为了满足检测要求，只是对流动相比例进行调整。现在检测制剂的时候，主成分和前边的杂质就总会遇到一次分的挺好，一次又分的不好，有的时候重新配制一份样品分离度就好啦，有时重新配制一下流动相就好了，开始觉得是色谱柱问题，可是用了新的色谱柱也还是这样。如果说是流动相pH的问题，我们之前做过一个片剂，就没有遇到过这种情况。 |
4个回答
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柱效的事，氨基柱柱效下降较快，两张图明显第二张峰宽较大，主峰及杂质都这样，虽然是同一根柱子，柱效也会有变化，在使用过程中，柱效慢慢变差，在冲洗后，柱效又有所回复，导致结果就是有时分离好，有时分离差，多注意保养柱子，及时观察柱效变化，可能对你有所帮助。 |
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也有可能该药物对pH值比较敏感，或者有机相水相比例变化一点也会影响，建议考察一下不同pH和流动相比例问题。 |
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遇到过你这种情况。当时第一时间考虑色谱柱问题，然而换了新色谱柱还是出现类似问题，显然关键因素不是由色谱柱引起，尽管氨基柱比较特殊；你的流动相是乙腈与缓冲盐按一定比例组成的吧？我那时候遇到的情况就是把流动相的组成比例各调整2~3个点（总的还是100%），后面完整得到主峰与杂峰分离（R≥1.5），建议你可以先尝试这一个变化。这里还意外发现一个现象，当氨基柱使用时间增加后，原先的流动相缓冲盐与乙腈的比例恢复最开始的比例也能正常分离，这个可以理解为氨基柱受损害后里面的填料结构有了一定的变化，这点你也可以留意对比。前面还无法正常分离的话，你再试试调整柱温或流速，只要主峰旁边的杂峰满足分离度要求都能够尝试下。 |