6个回答
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未灌流的脑，如果死后10分钟内没进固定液或者冷冻的话，估计已经不能用了。你蔗糖沉底的步骤是做冰冻用的，可以先做冰冻试一下。倒是没见过谁冰冻脱水步骤做了一半又转头做石蜡的… |
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做冰冻片应该没问题，我们实验室做冰冻片灌注不成功的话就会先取组织后马上放甲醛固定，蔗糖脱水后包埋。没发现有太大的影响。 至于蔗糖脱水后又改做石蜡片倒是没试过，毕竟已经脱水过，而做石蜡片是要经过酒精脱水二甲苯透明后浸蜡包埋。现在的问题是脱水应该怎么处理。个人觉得可以先洗掉蔗糖，再做酒精脱水等后续步骤，做石蜡片应该可行 |
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直接取脑，放百分之四的甲醛固定，不经心脏灌流固定，如果做常用抗体染色，比如NeuN c-fos等效价高的抗体，不会有太大的影响。如果做效价低的抗体建议严格试验操作。不管怎么说，冰冻切片可以试试。 对于石蜡切片，你已经进行脱水处理，石蜡浸润效果很差，切片质量比较难保证。不建议尝试。 |
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如果没想好下一步怎么做，又到了必须取脑的时候，我建议你经心脏灌注后，取脑放4%PFA，4度，可以放很久。等想好做什么再采取下一步行动。 没灌注的脑组织，如果你染一些血液里也有的细胞等，你将无法分清是血管内，还是核团上。 |
