我要做细胞周期,用了70%的乙醇固定细胞,先加400ulPBS重悬细胞,之后又逐滴加了1ml的无水乙醇,之后发现,细胞出现了大量的白色絮状沉淀,不知如何是好?不太明白什么原因,请高手帮忙!
70%的乙醇用去离子水或是超纯水配呀,不要用PBS配。细胞用PBS洗两三遍后,将PBS弃去,用去离子水或是超纯水配制的70%的乙醇重悬细胞,一定要将细胞吹散,然后放置4度冰箱。
加入乙醇的时候,要低速vortex,这样可以避免细胞抱团而形成沉淀。
细胞出现了大量的白色絮状沉淀应该是细胞破碎之后DNA释放出来,使细胞粘附在一起。75%酒精配制应该使用蒸馏水,而不是PBS