研究关于大鼠骨髓基质细胞体外诱导成骨方面,可在获得骨髓方面就碰到困难。我分离股骨、切除骨垢后,冲出的骨髓总是成血凝快样(老鼠也die了),请教如何能更好的获得骨髓,同时大鼠还能继续存活?谢谢!
你这个要求不亚于截肢手术了,一般老鼠的话,基本上也over了。冲出的骨髓成凝快状,我认为主要是你的操作速度比较慢的缘故,如果不影响的话,可以加点肝素试试看!好运
1 避免形成血凝块:冲洗的PBS或者培养液应该含有肝素(100U/ml)。2 若想取自体大鼠骨髓细胞,可以用10ml注射器(肝素化)直接从髂骨抽取,我们的经验是可以从其关节面进针抽,损伤虽然大,但比较确切。
我也提取过大鼠的骨髓,肝素自然要用。我的建议是在取股骨时要尽量缩短骨髓的缺血时间,先剪断周围的肌肉,最后结扎股动脉。如果过早的切断或者结扎给骨髓供血的血管,在你用肝素冲之前就已经凝固了。大鼠的血容量不大,手术时要尽可能减少失血量。必要时可通过尾静脉补液1~2ml。