一般的，当样品里里面的点的Rf指只要不是挨的太近,只要他们在板上通过调Rf0.2~03是分开的，那么，你按样品与硅胶的比例大约是1：20-30，基本上可以将它们分离开来。一般只要在一两天内，把柱子过完吸附量不会很大，我以前称量过，上柱前后样品损失不大，要是拖上一个星期，那肯定吸附的利害啦。当样品里里面的点的Rf值很接近时，我们一般要换填料了，如果用凝胶、MCI、ODS等手段还是分不开（特别是小极性的成分），那没有办法，只有在用硅胶分，这是，需要加大硅胶的量，有时根据需要放大到100~200倍。一般我倾向选粗柱子，让样品铺成薄薄的一层，然后不停的冲（能够用氮气瓶加压效果更好，这样大概5~6个柱体积后样品就开始下来了。只要在两天内不停的冲柱（晚上睡觉可以调速，让他慢慢滴，或者关掉），一般不会怎么损失样品的。而且这样效果还不错，可以达到自己想要的结果。冲了这么长的时间的柱子，我觉得只要冲柱时时间不是拖得太长，一般损失不是很大。

小柱子我也用200-300目，用硅胶H怕吸附太大，30mg样品我一般不上柱子,优选凝胶,还是不行就刮板(没用制备液相)。