我的样品是果实,经过提取,乙酸乙酯的萃取以及一根大硅胶柱得到一些量较多的流份。其中一些用石油醚:乙酸乙酯冲下来的流份易溶于乙酸乙酯,且溶剂挥干后也是粘稠状的膏状物。点板看它的成分也挺多,想再通过硅胶柱分段,但是用比较多的硅胶(比例为3硅胶:1样品,硅胶少拌不匀)拌样后用流动相氯仿:甲醇:水=50:1:0.5冲柱,流动相走到样品处就不往下流了。请问大家为什么会这样?我应该采取什么方法解决这样的问题?
你要分离化合物是不是显酸性的,如果是这样的话,你把水换成甲酸试试,甲酸的用量应该比水还要少些。
硅胶拌样一般在1.5:1到2:1就合适了,你的拌样硅胶多应该不是堵塞的原因。是不是你的柱层析硅胶太细,加上流动相中含水,两个原因导致柱子堵塞?
硅胶柱堵塞,与装柱等物理条件关系不大,与硅胶的粒径也没有太大关系,除非你是硅胶H。最可能的原因就是你的流动相对样品溶解性不好。建议先做小试,然后在拌样,上柱。这种情况下,用流动相拌样未尝不是个好办法,但前提是流动相能够很好的溶解样品。
其实,色谱分析时,用流动相溶解样品是最好的。