复苏了一管3个多月的细胞,发现细胞没长好,死了好多,所以现在怀疑是细胞冻存太久了,请各位给我分析分析
应该会有影响,长期保存还是置于液氮最好。3个月,虽然有些影响,但是复苏的话应该也还可以。
-80的冰箱毕竟不是液氮,效果肯定不行,而且如果实验室的小伙伴们经常开关你这冰箱,保存细胞的效果会更差。不过,你复苏细胞状态不佳,死很多,除了跟保存方式有关系,还可能跟:冻存前的细胞状态、复苏和冻存期间的操作、甚至是你冻存液的质量、复苏后使用的培养基等等多种因素都有关系。
三个月应该还好吧,除非你的冰箱在此期间有过温度的大幅度变化。建议:复苏后2-4h换液,除去不好的细胞,只留下贴壁好的细胞进行培养,一定要有耐心哦,这样剩下的细胞状态都是杠杠的。当然前提是你的细胞冻存前状态良好。还有,中间也记得换液,尤其死细胞多的时候,想象一下,一个活人,周围全都是死人,这个健康的活人估计心理状态也不好吧,给它都换成新鲜的培养液,环境搞好一点,及时一个人 ,活的应该也很自在吧。打个比方,如有不对,敬请指点。