2024-11-16 08:25:54

配好的完全培养基(含10%胎牛血清的DMEM)总是3天左右颜色就变 ,怎么办?

做的是翻转干涸法培养SD大鼠的骨骼肌细胞,使用的是四季青的胎牛血清和Hyclone 的低糖型DMEM培养基,我都是在超净台内配的,每次配100ml(10ml胎牛血清+DMEM培养基90ml),5天左右就发现培养基颜色产生变化。如图,左边是刚配好的,右边是配制5天后的。我一般配好的放于4度冰箱保存,第一天和第三天给细胞换液体,操作前会将配好的培养基放置于室温25分钟左右防止低温对细胞造成损伤,每次使用后我都会使用封口膜封住瓶口。问了实验室的师兄师姐,他们也无法找到原因,只有我一个人的是这样,他们的培养基都可以坚挺2周的。q.png


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3个回答

 这个是正常现象,配置好的培养液由于co2溢出,溶液变碱。经过显色剂变化,就是变紫。反复次数用的多或者溶液少的时候更容易出现。一般问题不大,放到培养箱内部,会由于co2浓度高,重新调节ph值的。一般配置好的一周内用完为佳

2024-11-16 09:17:45

1.这种瓶子密封性很差,这个我用过。2.HEPES对于酸碱的平衡比较重要。3.存放体积不要太小。4.盖子拧松,放到CO2培养箱培养一段时间,等恢复颜色再用呗

2024-11-16 09:18:36

换成带Hepes缓冲液的培养基问题应该就解决了

2024-11-16 09:26:29

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