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2024-11-21 19:05:17

用293T细胞做转染，之前转进去的质粒蛋白表达量挺高的，现在表达量降低了很多，怎么办？

之前一直用293T细胞做的转染，目的蛋白的表达量做实验也很正常，十一之后实验室的细胞房好像是受到了污染，实验室的293细胞状态都很差，也不一定是被污染，但新买的或者复苏的293都是养个三四代就长的很慢或者是直接死掉了，现在细胞虽然没有前一段时间那样，但经过这次之后，实验室的293细胞做转染后，蛋白表达量变的很低，到了做western都不容易检测到的地步，导致实验一直没办法进行了，已经拖了很长一段时间了，请问各位这个问题该怎么解决？感觉重新买细胞也不太能解决的样子，因为已经买了好几批细胞了，现在该怎么办呢？

肿瘤学肿瘤与细胞

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3个回答

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1. 重新换细胞啦，我估计是差血清导致细胞系退化。

2.我们实验室使用的是Invitrogen公司原装的HEK293FT细胞，293FT细胞转染效率和表达量都有非常好。

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2024-11-21 19:19:43

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去靠谱的单位买细胞，检测下支原体，还有培养体系是否彻底ok了；293是很基础的工程细胞，这一关过不了后面的实验很麻烦～

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2024-11-21 19:24:01

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买新的293FT再试一下

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2024-11-21 19:26:02

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提问时间：	2024-11-21
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