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2024-11-18 00:13:50

葡萄糖刺激INS-1细胞不产生胰岛素啊，怎么办？

我现在做大鼠胰岛素瘤细胞INS-1，用不同浓度葡萄糖刺激INS-1细胞，不产生胰岛素啊，检测不到啊！我是先用不含葡萄糖的KRB buffer孵育2个小时，然后再换成2.8mM和16.7mM的葡萄糖的KRB buffer 2个小时后，取上清用ELISA检测胰岛素，但是基本上检测不到啊。有做过的吗？有遇到过这种问题的吗？

我看国外文献里要用酸式乙醇提取上清液的胰岛素啊，不知道各位试过么
The cellular insulin was extracted by incubation in 1ml of acid-ethanol (ethanol/H2O/HCl, 14:57:3) overnight at 4°C and centrifuged at 700g for 3 min.

细胞生物学肿瘤学

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我用的也是24孔板，接种细胞数大约2*105个，第二天做GSIS，但是胰岛素含量很低，比ELISA试剂盒的下限还要低。

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2024-11-18 03:52:13

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我用的放免法做的，灵敏度更高。

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2024-11-18 03:53:07

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提问时间：	2024-11-18
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