第一次做细胞裂解,用的是康宁25cm2的培养瓶,长满,需要加多少裂解液呢?裂解液是买的碧云天的Western及IP细胞裂解液。
小培养瓶吗? 先把细胞离心收集下来看看细胞数目。六孔板的一个孔我加60-90的裂解液。我觉得一般都是种板子做实验啊
300ul-500ul左右
冰上三十分钟,之间每隔五分钟涡旋震荡十几秒。记得加蛋白酶抑制剂。三十分钟后最高速离心10到15分钟,取上清测定蛋白浓度进行后续实验。
不管是提DNA,RNA,还是蛋白质,现在市面上提多配套试剂盒的,买个试剂盒按着SOP步骤来,什么都搞定了。想问一下是自己配的细胞裂解液吗?