2025-03-26 00:48:02

cIEF/IEC 主峰、酸碱组分是如何定义的?

请教一下,如下图cIEF分析出抗体多个峰,CRO结论峰4是主峰,但峰面积并不是最大的?另外酸碱组分是如何定义的,主峰偏碱的算碱性组分,偏酸的算酸性组分?那又回到主峰的定义上了

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4个回答

我自己的理解,未做CPB处理 CEX或CIEF最大的意义在于表征原始样品发酵工艺一致性 。 而CPB处理后,更能透彻表征出其他PTM的比例,K会遮盖某些碱性修饰(若出峰位置一致)。

 


2025-03-26 01:07:23

我个人认为主峰是个人定义的,只要讲出科学依据就好。
因我所接触的单抗项目的IEC分离后,基本会对每个峰的组成做一些基本的研究,根据对该项目MOA、CQA的理解,定义主峰。
有可能我们在早期研究中定义的主峰,在最终的工艺中并不是最高的那个峰,但是一般是我们做质量研究、活性比较过程中很多情况下都和这个主峰比较。


2025-03-26 01:14:58

我们是面积最大的作为主峰,比主峰pI大的为碱性峰,另外的自然是酸性峰。你给的表里,6#峰算是主峰,7#峰为碱性峰,其他为酸性峰,这个是个相对值,个人观点。


2025-03-26 01:16:36

抗体cIEF的峰都有这么均匀这么多吗?感觉CEX做出来的应该是有明显的主峰的。要用cIEF检测方法要订质量标准就麻烦了


2025-03-26 01:20:37

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