培养条件：DMEM/F12+5%HS+EGF20ng/ml+hydrocortisone0.5ug/ml+choleratoxin霍乱霉素100ng/ml+insulin胰岛素10ug/ml+1%P/S，这个是培养条件，这个细胞主要谁就是培养条件复杂点，其他注意事项没有太多的

我用的是gibico的DMEM加上10%血清 不过血清用的是进口的 之前生长状态良好 而且生长迅速 形态感觉也挺好的 冻存后现在复苏 我觉得它好像有传说中的黑胶虫
我的消化时间为1分20秒左右 但是它贴壁特别紧 我得用力拍才能下来 之前试过轻拍 但消化时间太长 所以细胞状态就不太好了 但也能活
我前面养过两次都没活 后来从公司买的状态还是很好的
细胞状态不好的时候我会提高双抗浓度 一般几天就会好了
再就是我每天都换液 我觉得这个还是挺重要的 总的来说之前还是挺好的
月底开始做转染 不知道效果会如何

如果是ATCC的细胞，请注意培养基的问题，需要购买Lonza的试剂盒。
The base medium for this cell line (MEBM) along with the additives can be obtained from Lonza/Clonetics Corporation as a kit: MEGM, Kit Catalog No. CC-3150. ATCC does not use the GA-1000 (gentamycin-amphotericin B mix) provided with kit. To make the complete growth medium, you will need to add the following components to the kit (sold separately):

100 ng/ml cholera toxin

Note: Do not filter complete medium
图片请参考：