做过，全是cell signaling公司(国内吉泰公司代理）的。一支一般一千多。各种流式操作是有细微区别的，上面步骤就是cell signaling公司总的erk 和磷酸化的erk 的。
Cell signaling 公司 总p38、磷酸化p38流式步骤：

1、消化（不可过度），离心，收集细胞，弃上清；

2、将细胞重悬于1000ulPBS内，加入5ul纯甲醛（终浓度0.25-0.5%均可）；

3、震荡，离心，弃上清；

4、PBS冲洗细胞一次，离心，弃上清；

5、边震荡边缓慢加入预冷的90%甲醇（如：100ulPBS＋900ul甲醇）内；

6、冰上或40C孵育30min（或转入相应标记EP管内—20C保存）；

7、加入3ml孵育液（孵育液：0.3g牛血清蛋白溶于100mlPBS，4C保存），冲洗，离心，弃上清；

8、每个试管加入100ul孵育液重悬细胞，分别加入一抗2ul，室温孵育30min；

9、离心，弃上清，500ul孵育液重悬；

10、再离心，弃上清，500ul孵育液重悬，分别加入荧光二抗1ul（以后尽量避光操作）；

11、室温孵育30min；

12、离心，弃上清，500ul孵育液重悬细胞，转入相应标记流式检测管内，上机检测。

声明：以上为个人翻译和经验，以英文说明为准
另外：觉得流式结果影响因素很多。似乎没有western可信度高

MAPK的可以，总的、磷酸化的ERK、P38、JNK的都有一抗、二抗卖，可同时做流式检测

 偶觉得流式检测ERK、P38、JNK另一个好处就是灵敏度比western blot高，方便快速。western blot有时会因含量少等影响因素而没有条带出现

加拿大Immunechem公司的非放射性蛋白激酶C活性分析试剂盒安全、快速、稳定，可用于筛选蛋白激酶C抑制剂或激活剂、定性定量分析纯化或部分纯化的PKC激酶活性。测试盒原理：
基于ELISA的基本原理。PKC底物被包被在酶标板上，在ATP存在的前提下，PKC激酶将底物磷酸化，洗掉游离的PKC激酶和其他成分。再加入特异性磷酸化抗体（只识别磷酸化底物，而与非磷酸化底物无交叉反应。）检测残留在酶标板上的磷酸化底物。通过酶标二抗放大信号，读出OD值（蛋白激酶活性与OD值的对数成正比）。与对照组相比，得出处理组的蛋白激酶活性