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2024-11-23 10:07:38

如何解决细胞长得很慢的问题？

前几天传代的前脂肪细胞，1:3传代，胰酶消化后，其中一瓶传代依然用了原培养瓶（残留些胰酶），另外两个用新瓶培养。今天发现用新瓶培养的已经长到抑制状态可以进行分化了，可是在原培养瓶传代的细胞，长的密度还不到50%，细胞漂浮变多，觉得可能是传代时候胰酶没处理干净，请问有没有前辈遇到过这样的情况，这是什么原因，应该怎样避免？

细胞生物学生物化学凋亡坏死与自噬

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传代为什么要接种到原来的旧培养瓶里？即使用胰酶消化，瓶底的细胞也不可能一个不剩的全部消化下来，而且本身也会残留少许胰酶，细胞长得慢很正常

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2024-11-23 10:26:41

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trypsin可以被fbs中和所以传原瓶可以的长得慢可以适当提升FBS的百分比 12%左右试试看高了细胞容易长变形也容易污染

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2024-11-23 10:35:01

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一般胰酶里会含有EDTA，即使血清可以终止胰酶的消化，但是残留的EDTA会螯合钙离子影响细胞贴壁，也会影响细胞生长

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2024-11-23 10:35:32

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一般用的皿都是polylysine表面处理的一般来说不用太担心贴壁问题细胞培养操作手册里面还有不弃trypsin直接加fbs中和的方法不过那样确实不好我一般来说弃trypsin以后轻轻吹打

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2024-11-23 10:40:27

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血清对胰酶的意志作用很强的，排除胰酶影响的话，1 看细胞缩成团后即使移除胰酶然后再消化一阵；2 消化彻底后加培养基离心去上清

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2024-11-23 10:41:04

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这样可能是细胞对胰酶比较敏感，细胞被消化过度而导致的，养细胞会碰到这样的情况；下次传代时可以将细胞消化后，加胰酶等量含血清培养基终止消化，然后离心，弃上清，用少量培养基吹匀，再铺板

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2024-11-23 10:41:48

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