我将一个基因用慢病毒载pMSCV体转染细胞,现在想设计一引物检测此外源基因的表达。要遵从何原则,望赐教。
是RT-PCR检测mRNA水平的表达吗?根据你的基因序列设计特异性引物就可以了。
应该是用做于RT的,拿未转染的作对照。如果有这个表达产物的抗体,就直接时间梯度收样,做western,这样比较直接。
一般的操作都是转染之后的细胞单克隆化吧,之后再设计引物RT-PCR检测以及48h后收细胞做western吧